Ultrastructure study of Vanda Kasem’s Delight orchid’s protocorm-like body

Resumo

ABSTRACT

Growing orchids has been classified as an international business since it covers 8% of the world floriculture trade. Thus, large-scale micropropagation of orchid using tissue culture techniques and improvement of some essential traits, such as resistances to various diseases and pests, and tolerances to environmental stresses, such as low temperatures and low light intensities, via genetic engineering acknowledged the orchids as one of the top ten cut flowers. Protocorm-like bodies (PLBs) are excellent explants for clonal propagation, artificial seeds development and genetic engineering since they are organized and easily regenerable somatic embryos that propagate rapidly. Vanda Kasem’s Delight hybrid orchid’s PLBs derived from shoot tip culture were examined in order to understand the fundamental ultrastructure of PLB. Examination[A1]  of the cross sections of PLB revealed that PLB is made of a discrete bipolar structure that contains anterior and posterior meristems[A2] . Actively dividing meristem cells and outer layer lined by several rows of small and isodiametric cells with a dense cytoplasm and a prominent nucleus were also observed via cytological studies. Scanning Electron Microscope investigations revealed that the surface of PLBs is occupied by vertically positioned branched trichome appendages and regularly spaced stomatal openings with two guard cells. Organelles such as mitochondria of various sizes, shapes and biconvex chloroplast in the cytoplasm were revealed by Transmission Electron Microscope analysis. Hence, inheriting actively dividing cells, and bestowed with elements related to transpiration, photosynthesis and energy synthesizing power house makes PLB a suitable explant for micropropagation and genetic engineering studies.

Keywords: Vanda Kasem’s Delight, morphology, scanning electron microscope, transmission electron microscope.

RESUMO

Estudo da ultra-estrutura do protocormio da orquídea Vanda Kasem’s Delight

O cultivo de orquídeas é considerado um negócio internacional, abrangendo 8% do comércio mundial da floricultura. Assim, a micropropagação em larga escala da orquídea, usando técnicas de cultura de tecidos e melhoria de alguns tratos essenciais, tais como resistências a várias doenças e pragas, e tolerâncias a estresses ambientais (por exemplo baixas temperaturas ou intensidades de luz), através da engenharia genética, classifica as orquídeas entre as dez mais importantes flores de corte. Estruturas semelhantes a protocórmios (PLBs) constituem explantes excelentes na propagação clonal, desenvolvimento artificial de sementes e engenharia genética, uma vez que são embriões somáticos organizados, facilmente regeneráveis e de rápida propagação. PLBs dessa orquídea híbrida em estudo, derivados da cultura do meristema, foram examinados visando compreender a sua ultra-estrutura fundamental. O estudo das secções transversais revelou que o PLB é feito de uma discreta estrutura bipolar que contém meristemas anterior e posterior. Através do estudo citológico foram observadas células meristematicas ativamente em divisão além de uma camada exterior revestida por várias camadas de células pequenas e isodiamétricas com um citoplasma denso e um núcleo proeminente. No microscópio eletrônico de varredura observou-se que a superfície da PLB é ocupada por apêndices de tricomas ramificados, posicionados verticalmente, além de aberturas estomáticas, com duas células guarda, regularmente espaçadas. Organelas como mitocôndrios de vários tamanhos e formas além de cloroplastos biconvexos no citoplasma foram reveladas pelo microscópio eletrônico de transmissão. Assim, a observação de células em divisão ativa, e elementos relacionados com a transpiração e fotossíntese faz do PLB um explante adequado para estudos de micropropagação e engenharia genética.

Palavras-chave: Vanda Kasem’s Delight, morfologia, microscópio eletrônico de varredura, microscópio eletrônico de transmissão.

 [A1]The word ‘cytology’ has been removed

 [A2]Actually, two types of meristems.